荧光免疫层析技术使用的试纸条结构如下图示,由样品垫、标记物垫(含荧光微球交联的检测抗体/抗原)、硝酸纤维素膜(简称NC膜,含捕获抗体/抗原及二抗)、吸水纸以及底板组成。图中横向黑色箭头表示层析方向,T线为检测线,C线为控制线。


荧光免疫层析试纸条的结构示意图



如用双抗体夹心法检测样品中的抗原(疾病标志物),在加样孔中滴加含抗原的样品溶液后,抗原随样品溶液沿层析方向扩散到标记物垫处,与标记物垫中荧光微球交联的检测抗体1结合,形成抗原~抗体1-荧光微球复合物,该复合物将继续随溶液扩散到NC膜的T线,被固定在此处的抗体2捕获,形成抗体2~抗原~抗体1-荧光微球复合物,而未被捕获的抗原~抗体1-荧光微球复合物或抗体1-荧光复合物将继续随溶液扩散到C线,被固定在此处的二抗捕获,形成抗原~抗体1-荧光微球~二抗复合物或者二抗~抗体1-荧光复合物。仍未被捕获的含荧光微球的复合物将继续层析,最后被吸水纸吸收。10分钟左右层析完成后,试纸条在激发光照射后会发出荧光,根据T线处荧光信号的强度就可以检测样品溶液中抗原的浓度。



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